小鼠核糖核酸酶抑制剂的高效可溶性表达与氧化抗性鉴定

摘要：

核糖核酸酶抑制剂(Ribonuclease inhibitor,RI)是一种细胞内能够调节核糖核酸酶活性的胞浆蛋白,在分子生物学涉及RNA的实验中有广泛应用.商品化的小鼠RI(mRI)宣称其可能具有较高的氧化抗性.为获得mRI在大肠杆菌宿主中可溶性活性产物的有效重组表达,构建了含有mRI编码基因的重组质粒载体,在几种不同工程菌中进行了mRI蛋白的表达纯化,并观察了其氧化抗性特征.简单的组氨酸标签融合,即可在蛋白酶基因缺陷的BL21衍生的宿主菌中,经过适当诱导,获得较高水平活性产物的可溶性表达.纯化后产量在4～8mg/L水平,接近其他种属RI特殊优化表达系统的最高产量.该重组mRI与重组人RI(hRI)具有基本一致的核糖核酸酶抑制活性和抗氧化作用,与前人推测的抗氧化特征不同.

关键词：核糖核酸酶抑制剂、原核表达、活性、氧化抗性

所属期刊栏目：30

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：17-23