重组血管活性肠肽的制备及鉴定
为利用基因工程技术获得重组血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP),根据大肠杆菌的密码偏好性,设计并人工合成编码28个氨基酸的VIP的cDNA.克隆到表达载体PTWIN,构建重组质粒PTWIN-VIP,转化宿主菌E.coli strain ER2566,构建表达工程菌.实现由重组VIP,内含肽与纤维素结合域(cellulose binding domain,CBD)组成的融合蛋白表达.融合蛋白经几丁质亲和层析纯化,通过改变温度和缓冲液PH值切割融合蛋白,获得目的多肽.所得的多肽经质谱测定分子量结果与理论值相符.生物活性分析表明,重组VIP能显著降低急性炎症小鼠血清中抵抗素的水平,发挥抗炎作用.重组VIP的制备及其抗炎活性的鉴定为其深入开发奠定了基础.
血管活性肠肽、内含肽、纯化与鉴定、抗炎作用
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Q789(基因工程(遗传工程))
教育部科技重点项目207141;暨南大学青年基金51208018
2010-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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