原子力显微镜检测过表达α-突触核蛋白引起的线粒体结构变化
目的:利用原子力显微镜等方法,明确α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)过表达对线粒体的影响.方法:将腺相关病毒(AAV)载体介导表达的α-syn(AAV/α-syn)病毒包装颗粒,给大鼠脑内黑质区定位注射,建立α-yn过表达的大鼠模型,并以AAV介导表达的报告基因Lacz(AAV/LacZ)为动物对照组.提取大鼠黑质脑组织的线粒体,并通过JC-1染色检测线粒体膜电势(△ψ)变化和Western blot检测线粒体中α-syn蛋白量的变化;采用原子力显微镜观测线粒体表面结构的变化.结果:实验组大鼠黑质脑组织过表达α-syn基因,第16周时,Western blot显示线粒体中α-syn蛋白量增加约2倍;JC-1染色发现△ψ下降;原子力显微镜观测可见线粒体体积增大,线粒体膜表面出现较多孔道样改变.结论:大鼠黑质脑组织过表达α-syn基因,第16周时,可导致α-syn蛋白在线粒体积聚;并可引起线粒体增大、膜形成孔道样改变、△ψ下降.
帕金森病、α-突触核蛋白、线粒体、原子力显微镜
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R741(神经病学与精神病学)
国家重点基础研究发展规划973计划2006CB500706;国家自然科学基金30670655;北京市教育委员会科技发展计划KM200610025002;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20060025004;北京市自然荩金7082011
2010-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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