梅毒螺旋体重组抗原的表达及在梅毒血清学诊断中的应用

摘要：

目的:克隆、表达梅毒螺旋体(Treponema pallidum, Tp)膜蛋白TpN47、TpN17、TpN44.5和TpN15,建立双抗原夹心ELISA法,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用.方法:应用聚合酶链反应法(PCR)从Tp全基因组中扩增4个目的片段,克隆到载体pET-HT-JKM中,在BL21(DE3)plysS菌中诱导表达,Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,辣根过氧化物酶标记,双抗原夹心酶联免疫吸附法检测人血清中的特异性IgM和IgG抗体.结果:成功表达了4种重组蛋白用作ELISA包被和酶标抗原检测国家Tp参比血清,特异性和灵敏度均为100%;检测385份临床血清样本,结果与TPPA法相比符合率达到99%(P＜0.01),灵敏度和特异性分别为98.2%(162/165)和99.5%(219/220).结论:表达的4种重组抗原具有很好的生物活性,为理想的梅毒的血清学诊断用抗原.以这4种表达蛋白为基础建立的双抗原夹心ELISA法灵敏度高,特异性好,而且方法简单,结果客观,易于自动化操作,值得临床大力推广.

关键词：重组蛋白、梅毒螺旋体、双抗原夹心酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：29

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：深圳市科技计划项目200811

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：41-45