人甲状旁腺激素-血清白蛋白融合蛋白的构建及在毕赤酵母中的表达

摘要：

利用重叠PCR技术拼接PTH和HSA基因,并将构建好的融合基因插入到载体pUC19测序后插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOX Ⅰ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白PTH-HSA.重组质粒pPIC9K/PTH-HSA经Sal Ⅰ线性化后,电击转化毕赤酵母KM71,经G418筛选得到的转化子.PCR鉴定后,用甲醇诱导表达,蛋白电泳分析表明融合基因得到表达;Western b1ot分析表明发酵液上清中表达的融合蛋白PTH-HSA具有HSA的抗原性:用酶标法测定发酵上清中融合蛋白的甲状旁腺激素活性为318IU/ml.

关键词：人甲状旁腺激素、融合蛋白、表达载体pPIC9K、毕赤酵母

所属期刊栏目：27

分类号：Q5(生物化学)

在线出版日期：2007-04-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：14-18