重组hKGF2原核表达载体的构建及其蛋白质的纯化

摘要：

角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor 2,KGF2)是新近发现的成纤维细胞生长因子家族中的一员,又称FGF10,是上皮细胞特异性的促有丝分裂剂,具有广泛的应用前景.为构建其高效原核表达体系,用RT-PCR法从培养的人胚胎肺成纤维细胞中提取成熟hKGF2 cDNA,进行T-A克隆;经测序后,构建pET-30a(+)-hKGF2重组表达载体,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定为高效可溶性表达.镍亲和层析(Ni+-NTA)一步法纯化后获得纯度达95%以上的目的蛋白,生物活性研究表明,重组hKGF2能有效促进人胚胎肾上皮细胞的增殖.

关键词：重组hKGF2、克隆、原核表达、镍亲和层析

所属期刊栏目：27

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：国家自然科学基金30371304

在线出版日期：2007-04-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：9-13