γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)基因工程菌的构建及其发酵条件的初步研究

摘要：

利用PCR技术以Bacillus subtilis SYU 20016基因组DNA为模板,扩增出1.8kb编码γ-谷氨酰基转肽酶的基因ggt,将其连接到温控表达载体pBV220,得到重组载体pBV220-ggt,重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达.SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量大小为65kDa,同核酸序列测定的推导值相符.对含有ggt的基因工程菌进行表达研究表明:发酵培养温度为30℃,pH为7.2,装液量为20ml(250ml锥形瓶)的条件下42℃诱导4h后,重组菌的γ-谷氨酰基转肽酶酶活力达到6U/ml.目前报道的非基因工程菌(枯草芽孢杆菌NX-2)酶活最高仅为3.2U/ml.

关键词：茶氨酸、γ-谷氨酰基转肽酶、生物转化、发酵条件、质粒稳定性

所属期刊栏目：26

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：48-53