杜氏盐藻硝酸盐还原酶基因5′上游序列的克隆与功能分析

摘要：

目的: 克隆杜氏盐藻硝酸盐还原酶(NR)基因5′上游序列,并对其功能进行分析.方法: 利用BamHI、EcoRI、HindⅢ、PstⅠ、SalⅠ、Xbal 6种限制性内切酶分别酶切盐藻基因组DNA,并与接头连接,构建成盐藻基因组步行文库.采用LA-PCR方法,从上述盐藻步行基因组文库中扩增NR基因5′上游序列,测序并进行分析.为检测其表达特性,构建了该片段与GUS嵌合基因的表达载体pNR-GUS,通过电击法将所构建的重组表达载体转化盐藻,组织化学染色法观察GUS的表达.结果: 从盐藻基因组步行文库中扩增出约1200bp特异片段,序列分析表明5′上游序列含有启动子的特征性序列.GUS瞬时表达染色结果显示,该DNA片段具有硝酸盐诱导和铵抑制的启动子活性.结论: 所克隆的盐藻的5′上游序列可能是一种具有"开关"活性的可控性启动子.

关键词：杜氏盐藻、硝酸盐还原酶基因、5′上游序列、功能

所属期刊栏目：26

分类号：Q94(植物学)

资助基金：国家自然科学基金30270031;30300208

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7