一种亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型的建立

摘要：

为建立以多聚谷氨酰胺(polyQ)为靶点的亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型,以随机引物PCR法克隆了不同长度的CAG片段,经序列测定正确后,分别融合到已经建立的氯霉素抗性融合蛋白表达系统pCAR中CAT的N端.重组质粒转化大肠杆菌,并在其中诱导表达,SDS-PAGE和氯霉素抗性平板试验对目的蛋白可溶性与氯霉素活性进行测定.结果显示长度在40以上的polyQ为不溶性包涵体表达,表现为低水平的氯霉素抗性,40以下的polyQ则以可溶形式表达,表现为高水平氯霉素抗性,从而建立起能够模拟亨廷顿舞蹈症病理过程的体外细胞模型.通过检测模型细胞的氯霉素抗性,可以定性、定量地反映polyQ在体内的折叠状态和可溶性,故可以借助该模型对促溶药物或生物活性物质进行高通量筛选,为亨廷顿舞蹈症预防、诊断、治疗提供了新思路.

关键词：多聚谷氨酰胺(polyQ)、亨廷顿舞蹈症(HD)、蛋白溶解性、氯霉素乙酰基转移酶、细胞模型

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：18-23