小鼠canstatin C端片段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

为了构建小鼠canstatin C端片段的原核表达载体并在大肠杆菌中表达.以小鼠肝脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增小鼠canstatin C端片段(mCan-C)基因,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析.将mCan-C基因定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,构建表达载体pET/mCan-C,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.结果表明,小鼠canstatin C端片段的cDNA长度为399bp,含有1个终止密码,编码132个氨基酸,与已知的人canstatin C端片段氨基酸的同源性为61%.IPTG诱导mCan-C在大肠杆菌E.coli BL21中表达,表达量约占菌体总蛋白量的28%,重组蛋白主要以包涵体形式存在.首次克隆了小鼠canstatin C端片段的cDNA,IPTG诱导mCan-C在大肠杆菌E.coli BL21中高效表达.小鼠canstatin C端片段的cDNA序列已收入GenBank,接受号为:AY502947.

关键词：Canstatin cDNA克隆、血管生成抑制素、RT-PCR、原核表达

所属期刊栏目：25

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金30270031;河南省科技攻关项目0122032500;河南省高校杰出科研创新人才工程项目021001900

在线出版日期：2005-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：51-55