重组人红细胞生成素二聚体不同真核表达载体的构建及表达

摘要：

为构建重组人红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)二聚体真核表达载体,应用PCR方法扩增EPO cDNA,PCR产物克隆入T载体后,经酶切、连接、转化等过程分别构建了3个EPO二聚体的真核表达载体pBT-1c、pBT-2s及pBT-3c,经测序序列完全正确.然后将3个真核表达载体分别转染于COS-7细胞及CHO-dhfr细胞中,用ELISA方法检测,它们在COS-7的瞬时表达量分别为4IU/ml、11.5IU/ml和7.2IU/ml.其中EPO二聚体真核表达载体pBTsv稳定转染CHO-dhfr-细胞后,用氨甲喋呤(MTX)逐渐加压的方法筛选到阳性克隆,表达量可达到4000IU/106cells/72h.

关键词：人重组红细胞生成素、真核表达载体、二聚体

所属期刊栏目：25

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：吉林省科技发展计划20020404

在线出版日期：2005-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：39-44