牡蛎金属硫蛋白重组毕赤酵母菌株高效诱导表达工艺研究

摘要：

金属硫蛋白(MT)作为一类广泛存在并高度可诱导的多功能内源性蛋白,具有重金属解毒、抗辐射、清除自由基等功能,近年来已成为研究和开发的热点.为解决MT原料来源的瓶颈问题,本文以一株海洋源MT重组巴斯德毕赤酵母菌株(GS-115-MT)为研究对象,对其进行培育条件(温度、pH、溶氧、接种量)、诱导表达条件(溶氧、甲醇浓度、菌株生产状况、诱导时间、诱导金属及浓度)综合优化,以获得MT高效表达最佳工艺.结果显示,GS-115-MT的最佳生长条件为培育温度30℃,培养基初始pH为9,摇床转速240r·min-1,接种量4％;最佳MT诱导发酵条件为摇床转速为220r·min-1,甲醇浓度为5％,菌液OD600为9.7,诱导24h,Cu2+诱导浓度50μmol·L-1.在以上优化条件下,MT表达量达0.328mg·mL-1.本结果可为海洋源MT的规模化工业生产提供一定理论依据.

关键词：金属硫蛋白、重组酵母菌株、发酵、诱导

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：厦门海洋职业技术学院自然科学育青项目KYZY201807;厦门海洋研究开发院共建项目K190102;福建省科技计划引导性项目2017N0016

在线出版日期：2019-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：64-70