miR-20a靶向CCND1作用PI3K/AKT信号通路抑制皮肤鳞状细胞癌的发展

摘要：

目的:探究miR-20a与CCND1蛋白在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)中的作用关系,以及其可能涉及的信号通路分子机制.方法:分别收集皮肤鳞状细胞癌患者的皮肤癌组织及其邻近正常皮肤组织,采用qRT-PCR分析组织中miR-20a和CCND1基因表达水平.为探究miR-20a对CSCC细胞的影响,将SCL-1细胞分为对照组(不转染)、miR-NC组(转染miR-NC)和miR-20a mimics组(转染miR-20amimics);为探究CCND1与PI3K/AKT信号通路的关系,将SCL-1细胞分为对照组(不转染)、si-NC组(转染si-NC)和si-CCND1组(转染si-CCND1);为探究miR-20a与CCND1间的作用关系及对CSCC细胞的影响,将SCL-1细胞分为miR-NC 组(转染 miR-NC)、miR-20a mimics 组(转染 miR-20a mimics)、mimics+pcDNA 组(共转染 miR-20a mimics 和 pcDNA)和mimics+CCND1 组(共转染 miR-20a mimics 和 pcDNA-CCND1)采用 Western blot 分析 p-AKT、AKT、p-PI3K、PI3K 和 GSK-3β蛋白表达水平;采用MTT检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Transwell分析细胞迁移和侵袭情况;采用双荧光素酶报告基因检测分析miR-20a与CCND1的靶向关系 结果:CSCC癌组织和SCL-1中miR-20a均低表达,CCND1高表达.与对照组和miR-NC组比较,miR-20amimics组SCL-1细胞增殖水平以及侵袭和迁移数量均降低(P＜0.05),SCL-1细胞凋亡水平升高(P＜0.05),PI3K和AKT蛋白磷酸化水平降低(P＜0.05)TargetScanHuman数据库分析和双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-20a与CCND1存在靶向作用关系.与对照组和si-NC组比较,si-CCND1组SCL-1细胞中CCND1和GSK-3β蛋白表达水平以及PI3K和AKT蛋白磷酸化水平均降低(P＜0.01).与miR-20amimics组或mimics+pcDNA组比较,mimics+CCND1组SCL-1细胞增殖水平以及侵袭和迁移数量均升高(P＜0.05),SCL-1细胞凋亡水平降低(P＜0.05),PI3K和AKT蛋白磷酸化水平均升高(P＜0.05).结论:过表达miR-20a可能通过靶向抑制CCND1的表达而抑制PI3K/AKT信号通路的激活,从而抑制CSCC细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进癌细胞凋亡.

关键词：皮肤鳞状细胞癌、miR-20a、CCND1、PI3K/AKT信号通路

所属期刊栏目：23

分类号：R-33;R739.5(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金81703119

在线出版日期：2023-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：3416-3424