miR-155通过促进炎症因子释放参与脓毒症肠道屏障功能障碍的发生发展

摘要：

目的:探讨miR-155在脓毒症致肠道功能障碍中的表达及作用.方法:(1)临床实验:以2022年5月至2022年8月入住新疆医科大学第一附属医院重症医学科的脓毒症患者和同期健康体检者为研究对象,根据急性胃肠损伤分级(AGI)将脓毒症患者分为AGI组和非AGI组.根据28 d生存情况分为存活组和死亡组,采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)法前瞻性观察各组外周血miR-155的变化.(2)体内实验:将20只雄性S/D大鼠按照随机数字表法分为假手术组(sham组)和盲肠结扎穿孔术组(CLP组),采用qRT-PCR及Western blot法检测miR-155、肠道紧密连接蛋白(ZO-1、claudin-1)的表达,ELISA法检测大鼠肠道组织中IL-1β、IL-6、IL-18的表达水平.(3)体外实验:培养人结直肠腺癌细胞(Caco-2),并分为正常对照组(完全培养基培养48h)、脂多糖组(完全培养基培养24h后加入10μg/mLLPS处理24h).采用qRT-PCR检测miR-155的表达.在倒置荧光显微镜下观察细胞形态的变化.采用CCK-8检测细胞活力.采用免疫荧光观察Caco-2细胞中紧密连接蛋白ZO-1分布的变化.并行细胞旁通透性实验,观察两组细胞旁通透性的变化.结果:(1)脓毒症组和健康对照组相比,脓毒症患者外周血miR-155较健康对照组明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).AGI组患者外周血miR-155表达较非AGI组明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05).脓毒症死亡患者外周血miR-155表达显著升高(P＜0.05).(2)应用CLP模型进行体内动物实验,CLP组大鼠肠道组织miR-155表达较假手术组(sham组)明显升高.CLP组大鼠肠道紧密连接蛋白(ZO-1、claudin-1)较sham组下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).ELISA结果提示,CLP大鼠肠道组织中IL-1β、IL-6、IL-18水平较sham组显著升高(P＜0.05),且肠道组织中miR-155水平与IL-1β、IL-6、IL-18呈正相关(r=0.542,r=0.906,r=868,P＜0.05).(3)与正常对照组相比,经LPS处理后细胞形态破坏、细胞间紧密连接破坏、细胞活力减弱、细胞旁通透性增加.结论:脓毒症发生时伴有肠道屏障功能障碍,miR-155在脓毒症肠道屏障功能障碍中表达升高,并可能通过促进炎症因子的释放参与脓毒症肠道屏障功能障碍的发生发展.miR-155异常表达对脓毒症患者早期肠道功能障碍诊断及预后的评估具有重要价值,可作为脓毒症早期肠道损伤诊断及预后情况的重要指标.

关键词：脓毒症、肠道屏障功能障碍、miR-155

所属期刊栏目：23

分类号：R-33;R631.2(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区科技支疆项目

在线出版日期：2023-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2412-2418