7种茵陈单体化合物对黄疸大鼠血清培养的hiHep细胞中水通道蛋白8表达的影响

摘要：

目的:探究具有保肝利胆作用的7种茵陈单体化合物(6,7-二甲氧基香豆素、对羟基苯乙酮、绿原酸、咖啡酸、茵陈色原酮、东莨菪内酯和茵陈黄酮)对黄疸大鼠血清培养的hiHep细胞中水通道蛋白8(AQP8)表达的影响.方法:将SD大鼠分为正常组和模型组,通过α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导构建黄疸大鼠模型.检测两组大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平.将人源诱导型肝样细胞(hiHep)随机分为9组:对照组、黄疸血清组(JS组)、黄疸血清+6,7-二甲氧基香豆素组(JS+DME组)、黄疸血清+对羟基苯乙酮组(JS+4-HYD组)、黄疸血清+绿原酸组(JS+CHA组)、黄疸血清+咖啡酸组(JS+CAA组)、黄疸血清+茵陈色原酮组(JS+CAP组)、黄疸血清+东莨菪内酯组(JS+SCO组)和黄疸血清+茵陈黄酮组(JS+ARC组).对照组细胞使用含10％正常大鼠血清的培养基培养,其他组细胞均使用含10％黄疸大鼠血清的培养基培养.对照组和JS组细胞不做药物处理,其他组细胞均分别使用20mg/L的相应药物培养48h.通过四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力.检测各组细胞的蛋白质渗透压反射系数σ.通过qRT-PCR检测细胞中AQP8的mRNA水平,通过Western blot检测细胞中AQP8、环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)的蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ALP、ALT、AST和TBIL水平均显著升高(P＜0.05).各组细胞活力差异无统计学意义(F=1.085,P=0.391).与对照组比较,JS组细胞的 σ 值降低(P＜0.05),与 JS 组比较,JS+DME 组、JS+4-HYD 组、JS+CHA 组、JS+CAA 组、JS+CAP 组、JS+SCO 组和 JS+ARC组细胞的σ值均升高(P＜0.05).与对照组比较,JS组细胞AQP8的mRNA和蛋白相对表达量降低(P＜0.05),cAMP和PKA的蛋白相对表达量降低(P＜0.05).与JS组比较,JS+DME组、JS+4-HYD组、JS+CHA组和JS+CAP组细胞AQP8的mRNA和蛋白相对表达量升高(P＜0.05),cAMP和PKA的蛋白相对表达量升高(P＜0.05).JS组与JS+CAA组、JS+SCO组和JS+ARC组细胞AQP8的mRNA和蛋白相对表达量以及cAMP和PKA的蛋白相对表达量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:本研究表明6,7-二甲氧基香豆素、对羟基苯乙酮、绿原酸和茵陈色原酮可上调黄疸大鼠血清培养的hiHep细胞中AQP8的表达,这可能是茵陈治疗黄疸的机制之一.

关键词：黄疸、茵陈、水通道蛋白8、单体化合物

所属期刊栏目：23

分类号：R-33;R575.5(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金;空军军医大学第一附属医院学科助推计划

在线出版日期：2023-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2209-2214,2233