KGF联合HIF-1α对BECN1敲除IEC-6细胞缺氧的保护作用及机制

摘要：

目的:探讨KGF联合HIF-1α对BECN1敲除后的IEC-6细胞在缺氧应激状态下的保护作用及相关机制.方法:构建敲除BECN1基因的稳定细胞系IEC-6B-细胞,分为空白对照组(BC)、阴性对照组(NC)、HIF-1α组、KGF联合HIF-1α组(KH).观察细胞形态学改变.检测细胞存活率、ATP含量、细胞周期和细胞凋亡率.检测自噬相关基因表达水平和凋亡、自噬相关蛋白的表达.结果:低氧处理24 h后,各组细胞可见梭形、星形及其它异常形态变化;NC组细胞胞质内可见大量大小不一的吞噬溶酶体泡;其他各组细胞呈现细胞早期凋亡形态变化,BC组和KH组细胞胞质中可见自噬泡.与BC组相比较,各敲除组细胞存活率均显著降低(P＜0.01),其中KH组细胞存活率高于NC组、KGF组及HIF-1α组(P＜0.05).BC组细胞内ATP含量均显著高于其他各组(P＜0.05).与BC组和KH组比较,其他三组细胞G0/G1期百分比显著增加,细胞凋亡率均显著增加(P＜0.05).与BC组相比较,其余各组细胞自噬基因BECN1、SQSTM1及LC3基因mRNA表达均显著降低(P＜0.05);Beclin 1蛋白及LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值均显著降低(P＜0.05),且p62蛋白表达显著增加(P＜0.05).KH组的Bax/Bcl-2的比值、Caspase3蛋白表达低于NC组(P＜0.05).结论:KGF联合HIF-1α能促进细胞增殖、增强细胞能量代谢、减少G0/G1期阻滞细胞率、抑制细胞凋亡作用,对低氧应激的IEC-6B-细胞具有保护作用.

关键词：角质细胞生长因子、缺氧诱导因子1、肠影窝上皮细胞、缺氧、自噬

所属期刊栏目：23

分类号：R-33;Q78;Q813(医学研究方法)

资助基金：兰州市创新人才项目;军队后勤科研项目

在线出版日期：2023-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1849-1856