10.13241/j.cnki.pmb.2023.10.006
miR-22-3p 通过激活 PTEN/PI3K/AKT/NF-κB 信号通路加重慢性阻塞性肺疾病
目的:探索miR-22-3p对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的影响及作用机制.方法:将7周龄(体重250～280g)雄性SD大鼠随机分为 5 组(n=12):对照组(Con 组)、COPD 组、COPD+NC-agomir 组、COPD+miR-22-3p-agomir 组、COPD+NC-antagomir 组和COPD+miR-22-3p-antagomir组.Con组大鼠为正常饲养的大鼠,其他组大鼠均通过香烟烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导COPD动物模型.在CS暴露当天,Con组和COPD组大鼠鼻腔内注射50μL 生理盐水,COPD+NC-agomir组、COPD+miR-22-3p-agomir组、COPD+NC-antagomir 组和 COPD+miR-22-3p-antagomir 组大鼠分别鼻腔内注射 50 μL 10 nmoL 的 NC-agomir、miR-22-3p-agomir、NC-antagomir和miR-22-3p-antagomir,每2周注射1次,共注射6次.CS暴露90 d后,检测各组大鼠的最大自主分钟通气量(MVV)、0.3 s用力呼气量(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)和最大呼气峰流速(PEF).通过ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)水平.通过苏木精-伊红(HE)染色评价肺组织损伤.根据试剂盒说明检测肺组织丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平.通过RT-PCR检测肺组织miR-22-3p、磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、CD206和精氨酸酶1(ARG1)mRNA水平.通过Western blot检测肺组织PTEN、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子-κB(NF-κB)p65和p-NF-κB p65 的蛋白表达水平.结果:与 COPD 组和 COPD+NC-antagomir 组相比,COPD+miR-22-3p-antagomir 组大鼠的 MVV、FEV0.3/FVC和PEF均升高(P＜0.05);肺泡出血、肺泡壁断裂、肺泡间隔水肿和炎性细胞浸润等病变减轻;BALF中的IL-1β、TNF-α和MIP-2水平均降低(P＜0.05);肺组织SOD水平升高,MDA水平降低(P＜0.05);肺组织iNOS和CD86 mRNA相对表达量降低,CD206和ARG1 mRNA相对表达量升高(P＜0.05);肺组织miR-22-3p相对表达量降低,PTEN mRNA和蛋白相对表达量升高(P＜0.05);肺组织 p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT 和 p-NF-κB p65/NF-κB p65 的蛋白相对表达量降低(P＜0.05).结论:miR-22-3p 在COPD大鼠肺组织中上调,可能通过激活PTEN/PI3K/AKT/NF-κB信号通路,促进肺组织炎症反应和氧化应激,加重大鼠肺功能障碍和肺组织结构损伤.
慢性阻塞性肺疾病、miR-22-3p、炎症、磷酸酶与张力蛋白同源物
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R-33;R563(医学研究方法)
陕西省卫生健康委科研基金项目2021A006
2023-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
1835-1842
