smc5基因敲除斑马鱼肝脏转录组学分析

摘要：

目的:探讨smc5基因敲除对斑马鱼肝脏基因表达谱的影响,进一步明确smc5突变对斑马鱼代谢的影响.方法:用CRISPR/Cas9技术构建smc5基因敲除斑马鱼模型,取3个月的smc5-/-和野生型斑马鱼肝脏进行转录组测序,创建基因表达谱文库,观察smc5基因敲除后斑马鱼肝脏基因表达谱的变化,将筛选出的差异表达基因进行功能富集,并运用荧光定量PCR对KEGG通路中显著的差异表达基因进行验证.结果:成功构建出7号外显子上2碱基缺失造成移码突变的smc5基因敲除斑马鱼模型.RNA-seq发现smc5-/-斑马鱼的肝脏基因表达谱变化显著,包含p53的多个通路激活,如细胞周期和凋亡.糖酵解、脂肪酸降解与代谢、丙酮酸代谢等相关通路显著下调.荧光定量PCR结果与RNA-seq结果一致.结论:smc5基因敲除下调斑马鱼肝脏糖脂代谢.本研究结果为进一步研究SMC5基因在糖脂代谢调控中的潜在机制奠定基础.

关键词：CRISPR/Cas9、斑马鱼、smc5、代谢、转录组测序

所属期刊栏目：22

分类号：R-33;R575.5;Q959.4(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金;上海市自然科学基金

在线出版日期：2023-02-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：4401-4406