LncRNA MEG3通过抑制Wnt/β-catenin信号通路对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)人母系表达基因(Matemally expressed gene 3,MEG3)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:选取我院住院的OA患者和半月板损伤患者各40例,采用RT-PCR检测两组患者软骨组织和细胞中MEG3的表达.在OA软骨细胞中,转染siRNA-MEG3(si-MEG3)或过表达MEG3的慢病毒载体(LV-MEG3),采用CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况,RT-PCR和westem blot检测PC-NA、Dvl2、GSK-3β、cyclinD1和β-catenin mRNA和蛋白表达.结果:OA患者膝关节软骨组织中MEG3的表达水平明显低于半月板损伤患者软骨组织(P＜0.05),同时OA软骨细胞中MEG3的表达水平明显低于正常软骨细胞(P＜0.05).OA软骨细胞转染siMEG3后,细胞增殖能力和PCNA表达明显下降(P均＜0.05),G0/G1期细胞比例明显升高(P＜0.05),S期细胞比例明显下降(P＜0.05),细胞凋亡率明显增加(P均＜0.05).低表达MEG3能够显著降低Dvl2、GSK-3β、cyclinD1和β-catenin mRNA和蛋白表达水平(P均＜0.05),增加GSK-3β mRNA和蛋白表达水平(P均＜0.05).在OA软骨细胞转染LV-MEG3后,细胞增殖能力和PCNA表达明显升高(P均＜0.05),G0/G1期细胞比例明显下降(P＜0.05),S期细胞比例明显增加(P＜0.05),细胞凋亡率明显减少(P均＜0.05).高表达MEG3能够显著增加OA软骨细胞中Dvl2、GSK-3β、cyclinD1和β-catenin mRNA和蛋白表达水平(P均＜0.05),降低GSK-3βmRNA和蛋白表达(P均＜0.05).同时,采用XAV939阻滞Wnt/β-catenin信号通路能够显著逆转过表达MEG3对OA软骨细胞增殖和凋亡的影响.结论:MEG3在OA患者和软骨细胞中均显著低表达,并能够通过阻滞Wnt/β-catenin信号通路激活影响OA软骨细胞增殖和凋亡.MEG3可能成为OA治疗的重要靶分子.

关键词：lncRNA MEG3、骨关节炎、Wnt/β-catenin、增殖、凋亡

所属期刊栏目：19

分类号：R-33;R684.3(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金项目2016YFC1100304

在线出版日期：2020-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：4617-4623