缺氧通过SIRT1调控结直肠癌细胞自噬

摘要：

目的:探究缺氧调控结直肠癌细胞自噬的分子机制.方法:分别在常氧及缺氧(1％氧气浓度)条件下处理细胞,western blot检测细胞内沉默信息调节因子1(Silencing Information Regulator1,SIRTl)及自噬相关标志分子的表达情况;慢病毒转染构建SIRT1稳定过表达或敲减细胞株,利用透射电镜观察细胞内自噬体形成的情况;使用mRFP-GFP-LC3双标腺病毒感染细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察细胞自噬流的进展.结果:Western blot结果显示,缺氧条件下,HCT116及SW480细胞内SIRT1的表达水平随着缺氧时间的延长而降低,自噬特异性底物p62蛋白水平降低且LC3-Ⅰ/Ⅱ转换增加;与对照组相比,SIRT1过表达细胞内自噬特异性底物p62的表达水平升高而LC3-Ⅰ/Ⅱ转换受到抑制;相反在SIRT1敲减细胞内,p62的表达水平降低而LC3-Ⅰ/Ⅱ转换进一步促进.透射电镜结果发现SIRT1过表达后,细胞内自噬溶酶体形成减少、自噬体数量增多;激光共聚焦结果显示,SIRT1过表达细胞内绿色荧光淬灭减少、自噬体与自噬溶酶体的融合收到明显抑制,说明SIRT1通过抑制自噬溶酶体的形成,阻断自噬流的进展.结论:缺氧通过抑制SIRT1的表达促进结直肠癌的细胞自噬.

关键词：结直肠癌、缺氧、自噬、SIRT1

所属期刊栏目：19

分类号：R-33;R735(医学研究方法)

资助基金：肿瘤生物学国家重点实验室自主研究课题;国家自然科学基金项目

在线出版日期：2020-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2438-2443