FABP4对脂多糖诱导Kupffer细胞NF-κB活化和炎症的影响

摘要：

目的:研究脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)对脂多糖(LPS)诱导Kupffer细胞(KCs)NF-κB通路活化和炎症反应的影响.方法:通过梯度离心的方法分离大鼠KCs,按照1× 105接种于6孔板,贴壁后饥饿24 h,不同浓度脂多糖(LPS,0、5、10和20ng/mL)刺激24 h,提取蛋白和RNA,通过Western-Blot检测NF-κB通路蛋白表达变化,利用荧光定量PCR检测IL-1β和IL-6mRNA表达变化;利用RNAi沉默KCs FABP4表达,通过Westem-Blot和荧光定量PCR检测其对LPS诱导NF-κB通路活化的影响;分别利用FABP4细胞因子刺激和慢病毒上调FABP4的表达,通过Westem-Blot和荧光定量PCR检测其对KCs NF-κB通路和炎症反应的影响.结果:LPS能够以浓度依赖的方式(0、5、10和20 ng/mL)诱导KCs FABP4 mRNA和蛋白的表达,以20 ng/mL最为明显(P＜0.05);沉默FABP4可以显著减弱LPS(20 ng/mL)诱导的p-p65和p-IκBα的表达,以及炎症细胞因子IL-1β和IL-6的释放(P＜0.05);外源性FABP4(10 ng/mL和20 ng/mL)刺激24h后,能够明显诱导p-p65和p-IκBα的表达,促进炎症因子(IL-1β和IL-6)的合成(P＜0.05);利用慢病毒上调FABP4,可以显著诱导p-p65和p-IκBc的表达以及炎症因子(IL-1β和IL-6)的表达(P＜0.05),而抗氧化剂NAC(10 μM)处理,则显著减弱此效应(P＜0.05).结论:FABP4介导了LPS刺激KCs NF-κB通路的活化和炎症反应.

关键词：NAFLD、Kupffer细胞、FABP4、NF-κB、炎症反应

所属期刊栏目：19

分类号：R-33;R575.5(医学研究方法)

资助基金：陕西省社会发展科技攻关项目;西安市科技计划项目

在线出版日期：2020-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1845-1851