ISG15过表达抑制THP-1细胞的增殖与吞噬

摘要：

目的:干扰素刺激基因15蛋白(Interferon-stimulated Gene 15,ISG15)是由Ⅰ型干扰素诱导产生的类泛素蛋白,在先天免疫中起重要作用,本文旨在阐明ISG15的表达水平对巨噬细胞功能的影响并进一步探究其作用机制.方法:构建ISG15过表达质粒并通过慢病毒感染的方法整合进入THP-1细胞中,通过流式细胞仪分选出单克隆ISG15过表达细胞系,利用Western Blotting的方法验证ISG15在细胞内的过表达效果.在构建成功的细胞系中进行CCK8细胞增殖实验和Latex Beads细胞吞噬实验,最后通过定量蛋白质组学的方法观察细胞内蛋白质水平上变化.结果:Western Blotting的结果验证了ISG15在THP-1巨噬细胞系中的过表达效果,证明了ISG15过表达巨噬细胞系的成功构建.CCK8细胞增殖实验的结果表明,ISG15过表达的细胞系与对照组细胞系相比其增殖能力减弱;Latex beads细胞吞噬实验显示ISG15过表达细胞系的吞噬能力发生下降,并在蛋白质组学数据中找到糖酵解相关酶和膜转运蛋白下调的证据.结论:ISG15过表达能够降低与糖酵解相关的蛋白从而导致增殖能力的下降;同时也引起膜转运相关蛋白下调造成吞噬能力降低.

关键词：干扰素刺激基因15蛋白、巨噬细胞、吞噬、定量蛋白质组学

所属期刊栏目：19

分类号：R-33;Q78;Q511;R33-33(医学研究方法)

资助基金：国家重点研究;发展计划项目

在线出版日期：2020-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：601-607