qPCR array检测分析C57BL/6小鼠胚胎后肢发育基因表达谱

摘要：

目的:胚胎生育过程中因肢体发育异常造成的出生缺陷比率不低, 其相关基因表达模式尚不明确.本实验通过建立实时定量PCR芯片 (Real-time quantitative polymerasechain reaction array, qPCR array) 检测方案, 研究C57BL/6品系小鼠后肢发育相关基因的表达谱.方法:以同源异形盒基因家族 (Hox) 、Wnt5a、配对同源结构域基因 (Pitx1) 、成纤维生长因子 (Fgf8) 、音猬因子 (Shh) 等小鼠肢体发育相关的重要基因制作基因检测表达谱, 以C57BL/6品系怀孕雌鼠为材料, 取胚胎肢芽发育的四个关键时期 (E10.5, E11.5, E12.5, E13.5) 的胎鼠后肢, 利用qPCR array方案检测表达谱中基因的相对表达水平差异.结果:通过已建立的qPCR array检测了C57BL/6品系小鼠胚胎后肢发育时期Hox家族、Wnt5a、Pitx1、Fgf8、Shh等基因的表达差异.以E10.5为对照, 检测出在后肢发育时期基因呈三种表达模式, 即Hoxb6、Hoxb8、Hoxc8、Hoxc9、Hoxc10、Hoxd9和Shh基因的表达水平呈上调;Hoxa11、Hoxa13、Hoxc12、Hoxc13、Hoxd13等基因表达出现下调;Hoxc9、Hoxc10、Hoxc11、Hoxd9、Hoxd12、Fgf8和Pitx1等基因的相对表达量呈先上调后下调的曲线表达模式, 且有少部分基因在小鼠后肢发育时期表达水平无明显变化.结论:Hox家族、Wnt5a、Pitx1、Fgf8、Shh等基因在小鼠后肢发育时期表达, 并且表达模式存在明显差异.

关键词：实时定量PCR芯片、后肢发育、Hox基因

所属期刊栏目：18

分类号：R-33;Q813.7(医学研究方法)

资助基金：上海市科学技术委员会重点项目 12140900404,14140900502

在线出版日期：2019-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2824-2828