HIPK2对七氟醚暴露后原代海马神经元凋亡的影响

摘要：

目的:构建sh Hipk2慢病毒表达载体, 并探讨同源结构域相互作用蛋白激酶2 (homeodomain-interacting protein 2, HIPK2) 在七氟醚诱导的原代海马神经元凋亡中的作用.方法:设计并构建针对HIPK2靶基因的慢病毒, 转染至原代海马神经元, 通过免疫荧光检测转染效率, 应用RT-PCR验证干扰效果.病毒转染3 d后, 处理组经过4.1％的七氟醚暴露6 h后, 进行相应的检测.采用CCK8比色法检测各组细胞活性, LDH检测细胞毒性, FITC/PI流式细胞仪及Western Blot检测细胞凋亡.结果:RT-PCR显示较Scr组与Con组相比, sh HIPK2组HIPK2 m RNA水平明显下降 (P＜0.0001), 干扰效率为75.29％, 提示靶向沉默HIPK2的慢病毒sh RNA表达载体构建成功.Scr+Sev组细胞活力较Scr组相比显著下降而细胞毒性明显增加 (P＜0.05), sh HIPK2+Sev组与sh HIPK2组相比细胞活力与细胞毒性均无统计学差异 (P＞0.05).流式凋亡细胞检测结果显示Scr+Sev组凋亡细胞数明显高于Scr组 (P＜0.05), 而sh HIPK2+Sev组与Sh HIPK2组相比无统计学差异 (P＞0.05).Western Blot结果显示Scr+Sev组Cl-caspase 3蛋白水平较Scr组相比明显升高, sh HIPK2+Sev组与sh HIPK2组相比无统计学差异 (P＞0.05).结论:HIPK2可促进七氟醚引起的原代海马神经元的凋亡.

关键词：全麻、七氟醚、HIPK2慢病毒载体、凋亡

所属期刊栏目：18

分类号：R-33;R614;R338(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金项目 81371265

在线出版日期：2019-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2814-2818