1950MHz射频电磁场对人脐带间充质干细胞增殖和成骨分化的影响研究

摘要：

目的:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)具有广阔的临床应用前景,但由于其体外增殖和定向分化等问题,制约了其进一步应用.本研究拟探讨 1950MHz 射频电磁场(Radio-frequency electromagnetic fields, RF-EMF)对人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)增殖和成骨方向分化的影响,以期为MSCs 的体外增殖和定向分化提供一条新途径.方法:华通氏胶组织块法分离培养人脐带间充质干细胞,流式细胞仪检测间充质干细胞特异性标志物.选择鉴定后的第3至第6 代(P3-P6)hUC-MSCs 用于实验.将 hUC-MSCs 细胞暴露或假暴露于频率为1950 MHz,比吸收率(Specific absorption rate, SAR)分别为0.5,1.0 和2.0 W/kg 的RF-EMF 中,每天暴露 1 h(5 min 开,10 min 关),连续暴露 7 d.暴露结束后,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光检测增殖相关蛋白Ki67 表达,连续6 天用 CCK-8 方法检测细胞数.在成骨分化研究中,将 P3 代的hUC-MSCs 随机分为假暴露(sham)组,射频辐射暴露(RF)组,成骨诱导培养基组(Induction medium, OM)和成骨诱导培养基联合射频辐射暴露(OM+RF)组,暴露 SAR 值为2.0 W/kg,其它参数不变.暴露结束后立即检测细胞的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)活性.结果:原代培养的细胞具有 MSC 典型外观,且表达 MSCs 特异性表面抗原.与 sham组相比,不同 SAR 值 RF暴露后,hUC-MSCs 的增殖能力无明显变化,S期细胞比例及 Ki67 蛋白水平也无显著改变.此外,hUC-MSCs 经 SAR 值为2.0 W/kg 的RF 暴露 7 d,与 sham组相比其 ALP 活性无显著变化.与 OM组相比,OM+RF组的ALP 活性亦无显著改变.结论:华通氏胶组织块法能够培养出纯度较高的间充质干细胞,本实验条件下的1950 MHz 射频电磁场对 hUC-MSCs 的增殖和成骨分化均无显著影响.

关键词：射频电磁场、间充质干细胞、细胞增殖、成骨分化

所属期刊栏目：18

分类号：R-33;Q64;R331.2(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金项目31770905

在线出版日期：2019-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2218-2223