10.13241/j.cnki.pmb.2018.06.007
小鼠肝血窦内皮细胞分离与鉴定新方法
目的:改进小鼠原代肝血窦内皮细胞的分离方法.方法:经过小鼠肝脏的原位灌洗、消化制备单细胞悬液、差速离心、密度梯度离心以及免疫磁珠分选等步骤,分离获得小鼠原代肝血窦内皮细胞,再通过流式细胞仪鉴定、细胞内吞功能染色以及对细胞超微结构的电子显微镜观察,对分离出的肝血窦内皮细胞进行鉴定.结果:肝血窦内皮细胞的平均得率为5.6×106个/只小鼠,细胞活性比率约为96%左右;细胞流式鉴定结果显示新鲜分离出的肝血窦内皮细胞VEGFR3阳性率达到95.8%,VEGFR2+CD31+双阳性细胞阳性率达到93.7%.分选出的LSECs能够有效吞噬FITC-FSA和Dil-Ac-LDL.培养1天后肝血窦内皮细胞的微观结构,可见其特征性的窗孔和筛板.结论:本文总结的分离方法可以稳定、高效地获得小鼠原代肝血窦内皮细胞.
肝血窦内皮细胞、分离、鉴定
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R-33;R813;R322.47(医学研究方法)
国家自然科学基金面上项目81370556
2018-06-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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