二氢杨梅素激活AMPK通路预防糖尿病肾病的作用研究

摘要：

目的:探讨二氢杨梅素(DHM)对糖尿病肾病(DN)的预防作用及其与激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路的关系.方法:选择40只SD雄性大鼠,采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg的方法建立DN大鼠模型,并将其分为正常组(CON)、糖尿病肾病组(DN组)、实验组(DHM50 mg/kg、100 mg/kg)各10只.其中,实验组分别给予DHM(50 mg/kg、100 mg/kg)灌胃,DN组则给予蒸馏水灌胃,持续8周.采用HE和Masson染色法观察肾脏的病理形态,ELISA法检测大鼠肾脏组织中Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)、Ⅳ型胶原(COL Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)的含量,Western blot法检测大鼠肾脏组织中AMPK、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌动蛋白(a-SMA)、雷帕霉素哺乳靶蛋白(mTOR)、自噬相关微管相关蛋白1轻链3(LC3 Ⅰ/LC3 Ⅱ)、Beclin-1蛋白的表达.结果:HE染色显示与DN组相比,DHM组系膜基质增生减轻、系膜区变窄,肾小囊腔变宽以及囊壁黏粘减轻;Masson染色显示DHM组较DN组的肾间质蓝染程度变浅.ELISA结果显示DHM组COL Ⅰ、COLⅣ、FN的含量较DN组明显降低(P＜0.01),且100 mg/kg DHM处理组COL Ⅰ、COLⅣ、FN的含量明显低于50 mg/kg DHM处理组(P＜0.05).Westem blot检测结果显示DHM组肾脏组织AMPK、P-AMPK/AMPK、LC3 Ⅰ/LC3 Ⅱ和Beclin-1蛋白表达量显著高于DN组,且100 mg/kg DHM处理组以上指标均显著高于低剂量组(P＜0.01);而DHM组肾脏组织TGF-β1、α-SMA和mTOR的蛋白表达较DN组明显降低(P＜0.01),且100 mg/kg DHM处理组TGF-β1、mTOR表达显著低于50 mg/kg DHM处理组(P＜0.05).结论:DHM可显著减少DN的肾小球细胞外基质沉积,改善肾小球硬化和减轻肾脏纤维化的功能,其作用机制可能是通过激活AMPK/mTOR通路,促进细胞自噬和抑制TGFβ-1、α-SMA的表达.

关键词：二氢杨梅素、激活腺苷酸活化蛋白激酶、糖尿病肾病、自噬

所属期刊栏目：17

分类号：R-33;Q95-3;R587.2(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81372975

在线出版日期：2018-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：6613-6619,6612