10.13241/j.cnki.pmb.2015.23.004
小鼠脑潜伏巨细胞病毒激活模型的建立
目的:我们建立了小鼠脑潜伏巨细胞病毒激活模型,来实现小鼠脑内潜伏的巨细胞病毒(MCMV)的激活,并对潜伏MCMV激活时程进行分析,确定MCMV即刻早期蛋白基因1(ie1)基因转录,完成对ieJ基因转录和活病毒产生量时程动力学的分析,以及为进一步阐明原始MCMV在脑中潜伏的细胞类型提供模型.方法:采用出生后两天的BALB/c幼鼠,经右侧耳和眼连线为底边的正三角形的中心将Smith Strain MCMV 500 PFU/5 μ.L注射进入右侧脑室,培养至16周.之后,将脂多糖(LPS)依15 μg/kg体重(接近致死量)分别经腹腔和侧脑室内注射,对照组注射生理盐水.于注射后的1日,2日,5日,7日,14日和21日分别在LPS组和对照组中选取5只小鼠取脑.应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和高敏感性病毒空斑实验(结合病毒空斑实验和RT-PCR)测定MCMV即刻早期蛋白Ⅰ(IE1)mRNA的表达以及活病毒产生定量分析.结果:LPS组中,可于14日和21日的脑内检测到IE1 mRNA的转录,敏感性病毒空斑实验只在14日和21日出现细胞病毒效应(CPE),病毒量约为4.29× 104 PFU/μL和5.20×105 PFU/μL,相应对应MEF细胞匀浆物的RT-PCR结果检测到7,14,21日有IE1 mRNA转录.结论:该实验成功建立了小鼠脑潜伏巨细胞病毒激活的模型,并证实和分析了即刻早期蛋白基因ie1在潜伏MCMV激活过程中的表达和时程.该模型的建立将为进一步阐明MCMV在脑中潜伏细胞类型以及MCMV在急性感染、潜伏和重激活过程中对中枢神经细胞的影响提供研究平台,并为人巨细胞病毒(HCMV)的临床研究提供实验依据.
小鼠巨细胞病毒、潜伏、激活
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Q95-3;R373(动物学)
黑龙江省科技厅留学资金项目LC08C17;哈尔滨市科技局科技创新人才研究专项资金2008RFLXS012
2015-12-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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