RNA特异腺苷脱氨酶1(p150亚型)抑制肝细胞脂质合成

摘要：

目的:在油酸诱导的肝细胞脂肪变模型中,检测RNA特异腺苷脱氨酶1 p150亚型(ADAR1-p150)高表达细胞系中脂肪合成的变化.方法:利用本课题组前期摸索的油酸刺激人胚胎肝细胞L-02细胞系脂肪变的条件,qRT-PCR和Western-Blot检测油酸刺激组和对照组ADAR1-p150表达变化;将构建成功的ADAR1-p150过表达慢病毒载体GV 166-ADAR1-p150及空载体病毒GV 166-control感染L-02细胞,检测感染细胞中ADAR1-pl50的mRNA和蛋白表达水平;通过油红O染色和BODIPY染色观察L-02 ADAR1-p 150和L-02 control细胞中脂滴形成,并进一步利用高内涵系统检测其荧光强度,对脂滴合成作定量分析.结果:L-02细胞在油酸刺激后ADAR1-p150的mRNA和蛋白水平降低;成功构建ADAR1-p 150过表达慢病毒载体GV166-ADAR1-p150及空载体病毒GV166-control,qRT-PCR及Western-Blot检测显示病毒转染GV166-ADAR1-p150后ADAR1-p150在细胞中的表达水平显著升高;油红O染色和BODIPY染色发现L-02 ADAR1-p150较L-02 control细胞胞质中脂滴数量减少.高内涵筛选系统检测提示L-02 ADAR 1-p 150组中脂滴的荧光强度明显较L-02 control组低.结论:成功构建ADAR 1-p 150过表达稳定转染L-02细胞系,并证实高表达ADAR1-p150能够抑制脂肪合成.

关键词：ADAR1-p150、脂质合成、高内涵筛选系统

所属期刊栏目：15

分类号：Q78;R589(基因工程（遗传工程）)

资助基金：科技部重大国际合作项目81110200

在线出版日期：2015-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：829-833