荧光假单胞菌TonB依赖型外膜受体P698的研究

摘要：

目的:鱼类病原菌荧光假单胞菌是一种革兰氏阴性菌,在水产上可以引起多种经济鱼类的疾病,作为一种鱼类病原菌目前对其致病机理还知之甚少.本研究从鱼类病原菌荧光假单胞菌TSS中克隆得到了一个TonB依赖型的外膜受体(命名为P698),分析了其与细菌致病性的关系,研究了P698作为亚单位疫苗的免疫保护效应.方法:通过序列分析、荧光定量PCR、基因敲除、体外蛋白重组等方法研究P698的蛋白结构、表达情况以及其与细菌毒力的联系和免疫原性.结果:研究发现P698具有TonB依赖型外膜受体家族的典型结构.与正常培养条件相比,在缺铁条件下培养的TSS中p698基因的表达没有明显变化.通过插入失活获得p698缺失的突变株TSSP,生长分析发现跟野生株相比,突变株TSSP的生长能力有明显降低.在以大菱鲆为模型的活体侵染实验中发现,与野生株相比,突变株的体内侵染复制能力都有明显降低.为检测P698的免疫保护性,我们对P698进行了体外重组表达,获得了重组蛋白.用重组P698蛋白作亚单位疫苗免疫大菱鲆,在免疫后一个月的鱼体检测到了特异抗体的存在,并且受免疫鱼对于致死剂量的TSS攻毒表现出了显著的保护效应.结论:我们的研究结果表明P698与细菌的侵染有一定相关性,并且作为亚单位疫具有一定的免疫保护效应.

关键词：荧光假单胞菌、TonB依赖型受体、侵染、疫苗

所属期刊栏目：15

分类号：S917.1(水产基础科学)

资助基金：国家863基金项目2011AA10A216

在线出版日期：2015-02-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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