高灵敏焦测序结合生物发光分析仪检测甲型H1N1流感病毒

摘要：

目的:建立基于核酸序列分析的快速、准确、低成本的甲型H1N1流感病毒检测方法.方法:通过优化焦测序反应体系中ATP硫酸化酶和荧光素酶的浓度,建立高灵敏的焦测序反应体系;将该体系应用于低成本、小型化的便携式生物发光分析仪,焦测序分析流感病毒M、NP、HA基因片段的核酸序列.结果:优化后的焦测序反应体系可检测低至10 fmol的DNA样本,检测灵敏度较传统焦测序提高了10倍以上.对两例样本进行检测,根据所测得的M、NP、HA基因特异性片段序列,可以确认其均为甲型H1N1感染;另外,对M2蛋白阻断剂耐药性标志位点(S31N突变)的测定结果显示该病毒存在S31N突变,为M2蛋白阻断剂耐药型.结论:高灵敏焦测序体系结合便携式生物发光分析仪成功实现了对甲型H1N1流感病毒快速、准确的低成本检测.

关键词：高灵敏焦测序、甲型H1N1流感病毒、耐药性突变、便携式生物发光分析仪

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分类号：R373.13(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31300706;江苏省科技支撑计划-社会发展项目BE2011607;第54批中国博士后科学基金面上资助项目2013M542575

在线出版日期：2015-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：6818-6822