10.13241/j.cnki.pmb.2014.35.001
构建一种受hTERT启动子和miR-145双调控的更为安全的新型溶瘤腺病毒
目的:构建一种受人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子和miR-145双调控的更加安全的条件复制型腺病毒.方法:在已构建的hTERT启动子调控早期复制必需基因E1A的条件复制型腺病毒Adzq 11基础上,再将四个拷贝的miR-145的靶序列加入到E1A的3’非翻译区,构建新型溶瘤腺病毒Adzq11-145T.应用Real-time PCR测定人非小细胞肺癌细胞A549和人胚肺成纤维细胞HLF中miR-145的表达量;然后在这两株细胞中,分别转染Adzq11和Adzq11-145T对应的穿梭质粒及感染病毒本身,用Real-time PCR检测E1A表达量以测定调控效果;用病毒空斑单位法检测两种病毒的复制情况;用CCK8检测对A549和HLF细胞的杀伤作用.结果:构建的新型溶瘤腺病毒Adzq11-145T在HLF中复制量明显低于Adzq11,其E1A mRNA水平和杀伤效应也显著降低.而在A549中,Adzq11-145T在E1A表达、病毒复制和溶瘤能力方面较Adzq11均无显著降低.结论:成功构建出一种新的受转录和转录后水平双重调控的条件复制型腺病毒Adzq11-145T,它比仅加入hTERT启动子调控早期复制必需基因E1A的腺病毒Adzq11更加安全.
人端粒酶启动子、安全性、miR-145、溶瘤腺病毒
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Q78;R734.2;R730.231(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金面上项目30672440;上海市科委创新行动13140902802
2015-01-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
6801-6806