pIRES2-GDNF-NT-3真核表达载体的构建与鉴定

摘要：

目的:采用一种简便和高效的方法构建双基因共表达载体pIRES2-GDNF-NT-3.方法:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3是采用PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-GDNF-EGFP.神经营养素3 cDNA片段通过替换EGFP的方式插入到pIRES2-GDNF-EGFP中构建成为pIRES2-GDNF-NT-3双基因共表达载体.结果:人胶质细胞源性神经营养因子和神经营养素3被克隆,通过测序和酶切鉴定的得知与基因库报道序列一致.结论:人神经生长因子和神经营养素3双基因真核表达载体成功构建,它提供了一个新的表达系统,为进一步研究双基因的功能奠定了基础.

关键词：胶质细胞源性神经营养因子、神经营养素3、真核双表达载体、内部核糖体进入位点

所属期刊栏目：14

分类号：Q784;Q75(基因工程（遗传工程）)

资助基金：This work was supported by the Key science and technology project of Henan Province 122101310100;Tender Subject of Key Research Areas of Xinxiang Medical University in 2011,ZD2011-16;Key projects in Scientific Research of Henan Provincial Education Department 13A180850;河南省重大科技攻关项目122101310100;新乡医学院重点领域招标课题ZD2011-16;河南省教育厅科学技术研究重点项目13A180850

在线出版日期：2015-01-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：6056-6061