RNA干扰Ezrin体外对肾癌细胞株786-0增殖、凋亡的影响

摘要：

目的:构建膜-细胞骨架联接蛋白Ezrin基因特异性短发卡RAN表达载体(small hairpin RNA,shRNA),探讨其对肾癌细胞株786-0细胞凋亡、增殖的影响.方法:以Ezrin为靶基因,以Pgenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,设计2条发夹式RNA(shRNA),合成后克隆入载体Pgenesil-1,扩增并中量提取质粒,应用脂质体Lipofectamine 2000转染进786-0细胞,重组质粒转染786-0肾癌细胞株,用运实时荧光定量PCR进行筛选鉴定,筛选出抑制率较高的重组质粒载体shRNA-Ezrin1,用shRNA-Ezrin1转染786-0细胞,采用MTT、流式细胞仪、电镜检测,观察RNA干扰Ezrin后肾癌细胞株786-0细胞增殖能力的改变.结果:shRNA干扰后786-0细胞增殖活性减弱,G0/G1时段明显延长(P＜0.01),PI缩短(P＜0.01),细胞凋亡率增加(P＜0.01).结论:Ezrin与肾癌细胞凋亡、增殖有关,有望成为肾癌基因治疗的一个新靶点.

关键词：Ezrin蛋白、肾癌、RNA干扰

所属期刊栏目：14

分类号：R737.11(肿瘤学)

在线出版日期：2014-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：4811-4815