真核表达质粒pcDNA3.1-CSRP2-HA的构建及鉴定

摘要：

目的:构建并鉴定真核表达质粒PcDNA3.1-CSRP2-HA.方法:据GeneBank 中人CSRP2 CDS序列设计并合成引物,提取A549细胞总RNA,并将其逆转录成cDNA作为模板,进行PCR扩增,获得CSRP2目的基因后,再与PcDNA3.1-HA载体进行连接重组,构建PcDNA3.1-CSRP2-HA真核表达质粒,经限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测序分析等方法鉴定后,瞬时转染入A549细胞,Western blot法检验CRP2蛋白表达.结果:成功构建PcDNA3.1-CSRP2-HA真核表达质粒,Western-blot结果显示PcDNA3.1-CSRP2-HA能够在A549细胞中表达.结论:PcDNA3.1-CSRP2-HA真核表达质粒构建并鉴定成功,为后续研究CRP2在炎症诱发氧化损伤机制中的转录调控作用奠定了基础.

关键词：CSRP2、PcDNA3.1、真核表达质粒

所属期刊栏目：14

分类号：R363(病理学)

在线出版日期：2014-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：4014-4017