SD大鼠原代胰岛细胞分离、纯化及培养技术的改进

摘要：

目的:探讨大鼠胰岛细胞分离、纯化及培养的方法,并评价其生物学功能.方法:选用8～10周龄健康SD大鼠,采用胆总管逆行注射预冷胶原酶P溶液,37℃水浴静止消化,30目不锈钢筛网过滤,Ficoll400非连续密度梯度离心纯化.分离后的胰岛用DTZ染色计算胰岛产量,胰岛素释放试验评价其生物学功能.结果:胰岛细胞分布于Ficoll400浓度为23％～20％和20％～11％的界面之间.DTZ染色呈红色细胞团,胰岛产量为(606±56)IEQ/胰腺.纯度高达80～90％,活率≥90％,胰岛素释放功能良好.结论:胶原酶P溶液原位消化,Ficoll400纯化是一种高效简便的胰岛分离方法,分离的胰岛细胞数量多、纯度高及活性好.

关键词：SD大鼠、胰岛细胞培养、胰岛素

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分类号：Q95-3;R587.1(动物学)

在线出版日期：2014-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2816-2818,2822