人脐带间充质干细胞的成脂诱导分化及其相关基因鉴定

摘要：

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的分离提取、体外诱导分化为脂肪细胞的能力及其相关基因的表达情况.方法:取新生儿脐带经组织培养法提取后分离培养于αMEM完全培养基中,经大量纯化与扩增后,采用倒置显微镜观察其形态与细微结构;流式技术检测其细胞周期及表面标志;以含有成脂诱导剂的αMEM培养基对P3的hUC-MSCs进行培养,诱导其向脂肪细胞方向分化,对其对诱导后的细胞进行检测.应用油红“O”染色对其进行定性鉴定;应用实时定量RT-PCR对LPL、Leptin的基因含量进行测定.结果:经过组织培养法后,细胞呈贴壁生长,细胞呈梭性或旋涡状,形态不规则,多数有凸起,细胞核较大,核仁明显;第7代以前的细胞具有较强的生长活性;流式技术检测发现此类细胞高表达CD44、CD73和CD105等细胞表面标记,而几乎不表达CD34、CD45、CD31和HLA-DR.培养至第3代的细胞约72.724％的细胞处G1期、S期的细胞仅占18.069％,第7代时G1期细胞约为83.875％、S期为9.606％左右;经成脂诱导剂诱导分化后,细胞经油红“O”染色,分化为脂肪细胞的细胞着色并呈红色,实时定量RT-PCR结果显示该部分细胞表达脂肪细胞的标志性基因LPL和Leptin.结论:P7以前的hUC-MSCs具有较强的生长分化能力,可以向脂肪细胞进行分化并表达一定量的特定标志性基因.

关键词：人脐带间充质干细胞、体外诱导、脂肪细胞、基因鉴定

所属期刊栏目：14

分类号：R392.12;Q813

资助基金：甘肃省自然科学研究基金1107RJZA106

在线出版日期：2014-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2043-2046