GOS2基因启动子的荧光素酶报告基因载体的构建

摘要：

目的:克隆人G0S2基因启动子并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究G0S2基因转录调控提供质粒.方法:利用PCR技术从人胚肾293A细胞基因组DNA中克隆获得G0S2基因启动子的DNA片段,将其克隆至pGL3-basic表达载体中,并转化人大肠杆菌DH5α,经限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定得到确认;将重组载体质粒与半乳糖苷酶表达质粒psV-β-Galactosidase共转染至大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),检测细胞中荧光素酶的活性.结果:pGL3-G0S2-Promoter重组质粒插入片段和相邻序列正确,克隆的G0S2基因片段有启动子活性(P＜0.05).结论:成功构建了pGL3-G0S2-Promoter报告基因质粒,为进一步研究G0S2基因的表达奠定了基础.

关键词：G0S2基因、启动子、荧光素酶、报告基因质粒

所属期刊栏目：14

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省教育厅科研项目T201212和Q20122401

在线出版日期：2014-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1830-1833