Perilipin5基因功能结构域载体的构建及亚细胞定位分析

摘要：

目的:依据perilipin5的功能结构域,构建含perilipin5截断体的真核表达载体,并研究它们的亚细胞定位.方法:以小鼠肝脏cDNA文库为模板,PCR扩增出perilipin5的全长及功能结构域,将之分别装载入真核表达载体PCMV5中,并引入HA标签.酶切和测序鉴定,脂质体法将构建的质粒转染293T细胞,Western blot验证表达,免疫荧光检测标记HA,于荧光显微镜下观察perilipin5各结构域的亚细胞定位.结果:构建的质粒序列正确,转染细胞后可检测到HA-perilipin5融合蛋白的表达,免疫荧光显示含有1-188aa结构域的perilipin5截断体可定位于脂滴表面,1-188aa一旦缺失perilipin5的截断体则弥散于胞内.结论:包含perilipin5功能结构域的真核表达载体构建成功,perilipin5的1-188aa与其脂滴定位密切相关.

关键词：perilipin5、功能结构域、脂滴、亚细胞定位

所属期刊栏目：14

分类号：Q75;Q78(分子遗传学)

资助基金：国家自然科学基金项目81000171,51203185

在线出版日期：2014-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：805-810