黄芪甲苷Ⅳ通过影响β-actin对内皮型一氧化氮合酶的调节作用

摘要：

目的:研究黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ)对体外培养脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的调节作用及可能的机制.方法:培养人脐静脉内皮细胞系EA.Hy926,用AS-Ⅳ进行干预,同时给予或不给予骨架蛋白β-actin聚合稳定剂phalloidin,用免疫共沉淀方法检测eNOS与单体β-ac血结合状态的变化,用L-3H-精氨酸转化为L3H-瓜氨酸的同位素法测定eNOS活性,I125环一磷酸鸟苷(cGMP)放射免疫法检测细胞内cGMP水平,Western blotting方法检测细胞中eNOS和蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平,总蛋白水平.结果:①AS-Ⅳ作用10min后,细胞内单体β-actin与eNOS的结合明显增加(P＜0.05或P＜0.01),预先给予phalloidin显著抑制了AS-Ⅳ引起的两者结合的增加(P＜0.01).②AS-Ⅳ明显增加了eNOS活性(P＜0.05)、cGMP含量(P＜0.01)、eNOS Ser-1177磷酸化水平(P＜0.01)、Akt Ser-473磷酸化水平(P＜0.001),预先给予phalloidin明显降低了AS-Ⅳ引起的eNOS活性(P＜0.05)、cGMP含量(P＜0.01)和磷酸化水平的增加(P＜0.01),但对Akt的磷酸化没有影响.结论:单体β-actin与eNOS的结合在AS-Ⅳ激活eNOS的过程中起着不可或缺作用,其主要是通过促进Akt对eNOS Ser-1177的磷酸化来实现的.

关键词：黄芪甲苷Ⅳ、骨架蛋白、内皮型一氧化氮合酶

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分类号：R285.5;R54(中药学)

资助基金：南京医科大学科技发展基金重点项目2011NJMU200;南京医科大学科技发展基金面上项目2012NJMU224;南京市医学科技发展资金资助QRX11247

在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：5644-5648