Survivin和RhoA双基因沉默对卵巢癌细胞的增殖与侵袭影响

摘要：

目的:探讨RNA干扰(RNAi)双向沉默Survivin和RhoA基因表达对人卵巢癌HO8910PM细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响.方法:构建Survivin和RhoA基因的串联rnicroRNA干扰载体(Survivin-RhoA-microRNA),通过脂质体介导转染人卵巢癌HO8910PM细胞作为实验组,对照组为空载体转染组.转染48小时后,RT-PCR检测Survivin和RhoA的mRNA表达,Western-Blot检测Survivin和RhoA的蛋白质表达;利用MTT法、Transwell小室体外侵袭实验及流式细胞术检测转染后卵巢癌细胞的增殖、侵袭及凋亡情况.结果:Survivin-RhoA-microRNA明显抑制了HO8910PM细胞中Survivin和RhoA基因mRNA和蛋白的表达:转染48小时后,实验组Survivin mRNA和RhoA mRNA表达抑制率分别为68.82％、90.23％,Survivin和RhoA蛋白表达抑制率分别为63.91％、88.47％;MTT分析显示实验组细胞OD490的值为0.706±0.177,较对照组(1.172±0.241)明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);流式细胞术检测实验组细胞凋亡率为36.41±3.34％,较对照组(2.92± 0.78％)明显升高(P＜0.01);实验组细胞侵袭百分比为12.56±6.17％,较对照组(32.96± 5.14％)明显降低(P＜0.05).结论:成功构建Survivin和RhoA串联microRNA干扰载体(Survivin-RhoA-microRNA).Survivin和RhoA双基因沉默显著抑制了卵巢癌HO8910PM细胞的增殖和侵袭能力,并增加其凋亡率,两者具有协同作用,为双靶点治疗卵巢癌提供了新的思路和策略.

关键词：靶向沉默、卵巢癌、Survivin、RhoA、细胞增殖、细胞侵袭

所属期刊栏目：13

分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：2011年度广州市医药卫生科技一般引导项目201102A213110

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：5041-5045