乙酰短杆菌中核苷磷酸化酶的性质研究

摘要：

目的:以乙酰短杆菌完整细胞为酶源,研究不同条件下核苷磷酸化酶的性质.方法:将乙酰短杆菌湿菌体置于不同保藏温度及在不同种类缓冲溶液中考察其稳定性；在有或无核保护下核苷磷酸化酶对热的稳定性；并设计核苷的磷酸解反应或合成反应,测定核苷磷酸化酶的活力及酶促反应的表观米氏常数.结果:乙酰短杆菌中的核苷磷酸化酶经低温保藏可以保持较长时间的稳定性；菌体在60℃处理l小时即失去核苷磷酸化酶的活力,但是添加胸腺嘧啶有明显的保护作用；菌体中核苷磷酸化酶的合成能力明显大于磷酸解能力；对尿苷和5-甲基尿苷的表观米氏常数和最大反应速率分别为16.7、11.4 mmol/L,0.0063、0.0041mmol/L.min.结论:含核苷磷酸化酶的乙酰短杆菌完整细胞作为酶源,在低温下可以长时间保藏,反应中的碱基对核苷磷酸化酶的抗热性有益,该菌种可以作为工业上核苷磷酸化酶的来源.

关键词：核苷磷酸化酶、乙酰短杆菌、酶学性质、5-甲基尿苷、尿苷

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分类号：Q814;Q939.97(生物工程学(生物技术))

资助基金：上海市宝山区产学研合作专项基金项目CXY-2010-28

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4419-4423