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大乳头水螅RACE cDNA文库的构建

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目的:为筛选和克隆大乳头水螅发育调控相关基因的全长cDNA,构建大乳头水螅RACE cDNA文库.方法:提取大乳头水螅总RNA后从其中分离mRNA,运用SMART技术构建RACE cDNA文库.为鉴定所构建文库的质量,根据GenBank中大乳头水螅actin基因cDNA序列设计5'RACE和3'RACE的引物及用于扩增actin基因编码区全长序列的引物.结果:琼脂糖凝胶电泳结果表明,RACE cDNA文库中全长cDNA的长度集中在500-2 000bp之间.5'RACE、3'RACE PCR及扩增actin基因编码区全长序列时均以本文构建的大乳头水螅RACE cDNA文库为模板,这3个PCR反应均能扩增出产物,产物大小与目标片段预计大小相似.PCR产物分别经T/A克隆及测序后证明为大乳头水螅actin基因cDNA的相应序列.结论:RACE cDNA文库的成功构建为通过RACE方法获得大乳头水螅功能基因cDNA全长序列奠定了基础.

大乳头水螅、cDNA末端快速扩增技术、cDNA文库

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Q64(生物电磁学)

国家自然科学基金项目31171415;安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目KJ2011A130;安徽师范大学优秀创新团队建设计划2010-2011

2013-05-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

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现代生物医学进展

1673-6273

23-1544/R

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2013,13(4)

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