雷帕霉素对低氧下HL-60细胞的低氧调控信号分子表达的影响
目的:通过小分子化合物氯化钴( CoC12)模拟的低氧环境,分析低氧下及其雷帕霉素(RPM)作用下人急性髓细胞白血病细胞HL-60的低氧调控信号分子表达的变化；方法:常规方法复苏、传代、培养HL-60细胞,培养细胞进入对数生长期后用于实验.低氧模拟组、低氧雷帕霉素处理组、常氧雷帕霉素处理组分别用含200μmol/L CoC12、200μmol/L CoCl2/20nmol/L RPM、20nmol/L RPM的1640培养基处理生长状态良好的细胞,对照组细胞用1640培养基培养,各组置培养箱以37℃、5％ CO2培养,并于处理后24h、48h、72h收集细胞用于检测；采用实时荧光定量PCR方法检测低氧诱导因子(HIF-1α)、内皮细胞生长因子(VEGF)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及GAPDH在转录水平的表达；结果:①.与各时段对照组相比,低氧模拟组HIF-1α表达随时间逐渐增加,72h明显上调；与常氧雷帕霉素处理组各时段比较,低氧雷帕霉素处理组HIF-1α表达早期(24h)相对下调,后期相对上调；②.与对照组比较,各处理组mTOR表达均下调,低氧雷帕霉素处理组在早期(24h)下调显著；与常氧雷帕霉素处理组比较,低氧雷帕霉素处理组mTOR各时段的表达均相对下调；③与对照组各时段相比,低氧模拟组VEGF的表达在早期显著上调,但后期呈下调；常氧雷帕霉素处理组各时段VEGF的表达下调,与其比较,低氧雷帕霉素处理组各时段均呈相对下调.结论:常氧和低氧下RPM作用HL-60细胞后VEGF、mTOR的mRNA均表达下调,RPM可在低氧环境下增强了这种下调表达作用.
雷帕霉素、HL-60细胞、低氧、HIF-1α、VEGF、mTOR
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R733.71(肿瘤学)
2013-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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