表达增强型绿色荧光蛋白标记的hBax和hHGF双基因的慢病毒载体构建

摘要：

目的:构建绿色荧光蛋白标记的hBax和hHGF双基因共表达的重组慢病毒并鉴定.方法:通过重叠PCR技术构建attBl-K-hBAX/T2A/eGFP/P2A/hHGF-attB2基因片段,利用gateway technology构建慢病毒载体质粒pLV.EX2d.null-EF1A＞hBAX/T2A/eGFP/P2A/hHGF和阴性对照质粒pLV.EX2d.null-EF1A＞eGFP并测序,上述两种质粒分别与辅助质粒共转染293FT细胞包装病毒,荧光显微镜检测病毒滴度.结果:经鉴定慢病毒载体质粒构建正确,荧光显微镜检测hBax和hHGF共表达慢病毒滴度为7.8× 107 TU/mL,仅表达绿色荧光蛋白的阴性病毒滴度为9× 107 TU/mL.结论:表达增强型绿色荧光蛋白标记的hBax和hHGF 双基因的慢病毒构建成功并获得高滴度的病毒感染液.

关键词：慢病毒载体、肝细胞生长因子、冠状动脉旁路移植术、再狭窄

所属期刊栏目：12

分类号：Q75;Q78;R373.9(分子遗传学)

资助基金：山东省自然科学基金2005zrb104001

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3473-3477