人关节软骨细胞的体外分离、培养与鉴定

摘要：

目的:研究人关节软骨细胞的体外分离、培养及鉴定方法,观察各代人关节软骨细胞的形态学特性.方法:取人创伤性截肢的无菌膝关节软骨,采用两步酶消化法分离培养人关节软骨细胞,并进行传代培养.通过倒置相差显微镜下观察细胞形态,绘制生长曲线,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色对细胞进行鉴定.结果:两步酶消化法消化出的软骨细胞呈圆形,培养2-3天,细胞贴壁、变形,呈三角形或多角形,2周左右细胞融合成层,传代5次后出现去分化.软骨细胞增殖和生长缓慢.形态学、免疫组织化学染色显示细胞培养5代以内可以保持表型的稳定.结论:本研究采用胰蛋白酶及Ⅱ型胶原酶联合消化法获得大量高纯度、高活性的人关节软骨细胞.5代以内细胞生长良好,生物学特性明显,适合于实验研究,5代以后出现去分化现象.

关键词：人关节软骨、软骨细胞、细胞学

所属期刊栏目：12

分类号：R318.17;Q813(医用一般科学)

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3040-3044