利用逆转录病毒载体建立SMAD2稳定干扰的人胚胎干细胞系
目的:建立SMAD2稳定干扰的人胚胎干细胞系.方法:利用包装细胞获得重组的逆转录病毒,感染人类胚胎干细胞,为干扰组ShSMAD2、载体组VECTOR和野生型组WT;经荧光筛选获得阳性克隆;Realtime-PCR检测SMAD2 mRNA的表达.结果:带GFP荧光标记的SMAD2特异性shRNA逆转录病毒感染人类胚胎干细胞后,获得稳定干扰SMAD2表达的人胚胎干细胞系.经检测shSMAD2组SMAD2mRNA表达较VECTOR和WT组明显降低,VECTOR和WT组之间无明显差异.结论:通过SMAD2特异性shRNA逆转录病毒载体构建了稳定干扰SMAD2的人类胚胎干细胞.
人胚胎干细胞、RNA干扰、SMAD2
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Q291;Q813.1
高等学校博士学科点专项科研基金新教师基金项目200805331133;国家“863”计划项目2006AA02A102;国家自然科学基金项目81101510;30800659;湖南省自然科学基金青年基金项目09JJ4009;中央高校基本科研业务费青年教师助推基金项目201012200219
2012-08-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
2801-2803