结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c的表达、纯化和鉴定

摘要：

目的:克隆结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c基因,构建其原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1733c基因片段,克隆入pMD 18-T载体,序列测定正确后将其亚克隆入原核表达载体pPro-EXHTb,并在大肠杆菌DH5α中进行表达,表达蛋白经SDS-PAGE及Western-blot分析后,以Ni-NTA亲和层析纯化蛋白.结果:成功克隆了Rv1733c基因片段并构建了其原核表达载体pPro- EXHTb-1733c,转化E.Coli DH5α后能表达大小约30 KD的蛋白,Western-blot分析表明表达产物正确.通过亲和层析获得纯化蛋白.结论:成功构建结核分枝杆菌持续感染期抗原Rv1733c原核表达载体pPro-EXHTb-1733c,并获得纯化蛋白,为研究新型结核疫苗的靶抗原奠定了基础.

关键词：结核分枝杆菌、持续感染期抗原Rv1733c、原核表达、纯化

所属期刊栏目：12

分类号：R378.911(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30801055

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1868-1871