交联聚乙烯亚胺衍生物的构建及其转染COS-7细胞的研究
目的:优化构建交联聚乙烯亚胺( Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其对非洲绿猴肾成纤维细胞系(COS-7)的转染活性和细胞毒性.方法:以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力,MTT法检测PEI-Bu对COS-7的毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/DNA复合物在COS-7细胞的转染活性.结果:凝胶电泳表明PEI-Bu/DNA在质量比大于1时即具有复合DNA的能力,PEI-Bu的细胞毒性随浓度增大而增大,在同一浓度下PEI-Bu的细胞毒性小于PEI 25kDa,(P<0.05),PEI-Bu/DNA在质量比为5时达到最高转染活性,高于PEI 25 kDa(P<0.01),并与Lipofectamine2000相当(P>0.05).结论:PEI-Bu在COS-7细胞中是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒基因载体(与商业化的PEI 25kDa比较),其在基因治疗领域中具有潜在的应用前景.
聚乙烯亚胺、非病毒基因载体、转染效率、细胞毒性
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Q813;R915(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金资助项目81001416;上海市科委基金项目10JC1408902
2012-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1805-1807,1084