五种主要上呼吸道病毒多重RT-PCR检测方法的建立

摘要：

目的:建立甲型、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒A型、B型(RSV-A、RSV-B)和腺病毒(ADV)五种主要上呼吸道病毒的多重RT-PCR检测方法.方法:利用Primer premier5.0分别针对甲型流感病毒的M基因、乙型流感病毒的PBI基因、RSV-A和RSV-B的F基因及ADV的hexon基因设计五对特异性引物,对Mg2+、dNTP、引物浓度及退火温度等进行优化,建立同时检测甲型、乙型流感病毒、RSV-A、RSV-B和ADV的多重RT-PCR方法,并验证该检测方法的灵敏性.结果:所建立的五种病毒的多重RT-PCR方法可以同时或者分别扩增甲型、乙型流感病毒、RSV-A、RSV-B及ADV的141bp、635bp、525bp、377b和283bp基因片段,敏感度分别达到770PFU/ml、800PFU/ml、680PFU/ml、970PFU/ml和850PFU/ml,且五种病毒间无交叉反应.结论:所建立的多重RT-PCR方法可以迅速准确地检测甲型、乙型流感病毒、RSV-A、RSV-B和ADV,为五种病毒的检测提供了一种方便易行的方法.

关键词：流感病毒、呼吸道合胞病毒、多重RT-PCR

所属期刊栏目：12

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2012-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1342-1345,1368